實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)院經(jīng)常需要長(zhǎng)期需要儲(chǔ)存細(xì)胞。常規(guī)做法是將其置于液氮中冷凍(在常壓下,液氮溫度為-196℃),令細(xì)胞處于休眠狀態(tài),從而延長(zhǎng)細(xì)胞的生命。
我們都知道,細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境需要嚴(yán)格的無(wú)菌,盡可能避免細(xì)胞出現(xiàn)各類(lèi)污染狀況。細(xì)胞在長(zhǎng)期儲(chǔ)存過(guò)程中,雖然置于密閉的凍存管內(nèi),對(duì)于外在環(huán)境的無(wú)菌要求,相對(duì)于37℃培養(yǎng)時(shí)會(huì)低一些,不需要嚴(yán)格的無(wú)菌,但依然要對(duì)液氮罐定期清潔,保證其潔凈、無(wú)雜物。
那么該如何對(duì)液氮罐進(jìn)行有效清潔呢?
曾有研究人員用拭子涂抹取樣培養(yǎng)鑒定的方法,對(duì)使用超過(guò)一年以上的液氮罐進(jìn)行檢測(cè)微生物,發(fā)現(xiàn)有被細(xì)菌、真菌,甚至是支原體污染的情況出現(xiàn)。
因此,要定期對(duì)液氮罐進(jìn)行清潔。可在補(bǔ)充液氮前,對(duì)液氮罐進(jìn)行清潔。具體做法如下:
1、將凍存的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至另一潔凈的液氮罐中(盡量將所有配套器材全部更換為潔凈的,包括提籃和凍存盒)。
2、將待清潔的液氮罐中的液體倒出,靜置1-2天,待溫度恢復(fù)至0℃以上。
3、用常溫水沖洗,此時(shí)個(gè)別融化物質(zhì)粘在內(nèi)膽上,應(yīng)盡量全部洗刷干凈(同時(shí)對(duì)液氮罐中提籃和凍存盒做同樣處理)。
4、再用中性洗滌劑輕柔擦拭液氮罐內(nèi)壁和罐口部位,用水沖洗干凈(同時(shí)對(duì)液氮罐中提籃和凍存盒做同樣處理)。
5、建議用支原體祛除噴霧劑,對(duì)液氮罐內(nèi)壁進(jìn)行噴灑或擦拭(同時(shí)對(duì)液氮罐中提籃和凍存盒做同樣處理)。干燥后,倒入液氮,將細(xì)胞裝入凍存盒,放進(jìn)液氮罐中即可。